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吸水纸中革兰氏染色配制、检验说明

2013-02-03

细菌先经碱性染料结晶紫染色。再经碘液媒染以增加染料与细胞的亲和力)后,用酒精或丙酮脱色,再用复染色剂染色。不被脱色而坚持原颜色者为革兰纸阳性菌G+被脱色后又被染上复染剂的颜色者为革兰氏阳性菌G-此法可将细菌分为两大类。

染液配制:

① 结晶紫染液取结晶紫饱和溶液20ml+1%草酸铵水溶液80ml混合过滤。

② 卢戈碘液取碘化钾2ml以10ml蒸馏水充分溶解,然后加碘1g待完全溶解后加蒸馏水至300ml

③ 脱色剂 95%乙醇。

检验方法】

1取培养的细菌分别涂片、固定。

2染色1分钟。加草酸铵结晶紫染色剂一滴。>

3倾去染液并用洗瓶装水轻轻冲洗。

4水洗,加碘液(卢戈液)染1分钟。然后用吸水纸吸干。

5滴加95%酒精脱色(洗至流下的酒精中无紫色时为止)30秒,将载玻片略倾斜。革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色然后水洗。

6染色30秒水洗,加藏花红(番红)复染。用吸水纸吸干或烘干。

7用油镜镜检观察。

8.革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。


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